配對抗體指的是可以同時結合在一個抗原分子上的兩個抗體。配對抗體，一般應用于雙抗夾心法 ELISA 實驗。

抗體配(pei)對(dui)的原理

通常情況下，一個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)分(fen)子(zi)擁有(you)多個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)(ding)(ding)簇，將抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)注射入動物體(ti)內進行(xing)免(mian)疫，針(zhen)對不(bu)(bu)同(tong)(tong)的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)(ding)(ding)簇會產生(sheng)不(bu)(bu)同(tong)(tong)的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)。產生(sheng)的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)具(ju)有(you)特異性(xing)與專(zhuan)一性(xing)，即一個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)分(fen)子(zi)只會特異性(xing)地結(jie)(jie)合一個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)(ding)(ding)簇。兩個(ge)(ge)針(zhen)對不(bu)(bu)同(tong)(tong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)(ding)(ding)簇的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)，有(you)可能(neng)同(tong)(tong)時(shi)(shi)結(jie)(jie)合到抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)分(fen)子(zi)上(shang)。如果兩個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)同(tong)(tong)時(shi)(shi)結(jie)(jie)合到同(tong)(tong)一個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)分(fen)子(zi)上(shang)，那么這兩個(ge)(ge)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)就是配(pei)對抗(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)。

配(pei)對抗體的制備與(yu)篩選

需要(yao)注意(yi)的(de)(de)(de)是，即使兩(liang)(liang)個抗(kang)體(ti)針對的(de)(de)(de)是不同(tong)的(de)(de)(de)抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)(ding)簇(cu)，也(ye)并(bing)不意(yi)味著(zhu)這兩(liang)(liang)個抗(kang)體(ti)分子(zi)一定(ding)(ding)可以同(tong)時(shi)(shi)(shi)與(yu)抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)分子(zi)結合(he)。當一個抗(kang)體(ti)與(yu)抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)結合(he)后，有可能會導致其(qi)他結合(he)位點（抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)(ding)簇(cu)）構型(xing)的(de)(de)(de)改變，從而導致其(qi)他的(de)(de)(de)抗(kang)體(ti)無法(fa)(fa)正常結合(he)到(dao)抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)上。位阻效應的(de)(de)(de)存(cun)在，也(ye)可能使兩(liang)(liang)個結合(he)位點距離較(jiao)近的(de)(de)(de)抗(kang)體(ti)無法(fa)(fa)同(tong)時(shi)(shi)(shi)結合(he)在抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)上。因此想要(yao)得(de)到(dao)可以同(tong)時(shi)(shi)(shi)結合(he)在抗(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)分子(zi)上的(de)(de)(de)配對抗(kang)體(ti)，在制(zhi)(zhi)備(bei)出抗(kang)體(ti)后，還需要(yao)對得(de)到(dao)的(de)(de)(de)抗(kang)體(ti)進(jin)行篩選(xuan)(xuan)。這就意(yi)味著(zhu)，要(yao)制(zhi)(zhi)備(bei)配對抗(kang)體(ti)，要(yao)完成以下兩(liang)(liang)步工作：抗(kang)體(ti)的(de)(de)(de)制(zhi)(zhi)備(bei)；配對抗(kang)體(ti)的(de)(de)(de)篩選(xuan)(xuan)。

抗體(ti)制備

 為了便于后續的(de)(de)篩選，制備(bei)的(de)(de)抗(kang)(kang)體(ti)應為單克隆抗(kang)(kang)體(ti)，通常利用雜交瘤技術進行單克隆抗(kang)(kang)體(ti)的(de)(de)制備(bei)。 注意：如(ru)果單克隆抗(kang)(kang)體(ti)很少(shao)，很可(ke)能會找不到可(ke)以配(pei)對的(de)(de)抗(kang)(kang)體(ti)，因此，在免(mian)疫動物(wu)的(de)(de)時(shi)候，應多(duo)免(mian)疫幾只(zhi)動物(wu)，以獲得更多(duo)的(de)(de)單克隆抗(kang)(kang)體(ti)。

配對抗體(ti)的篩選(xuan)

通常，配對抗體篩選的方法是雙抗夾心 ELISA 法。篩選的原理為：在得到了單克隆抗體后，從中取出兩種單克隆抗體，一種作為捕獲抗體，另一種作為標記抗體（HRP 酶標記），將捕獲抗體包被在抗原板上，先加入抗原，孵育后洗去未結合的抗原，再加入標記抗體 孵育后洗去未結合的標記抗體，最后加入顯色液顯色。如果可以顯色，說明標記抗體與抗原特異性結合，該捕獲抗體與標記抗體為一對配對抗體。如果不能顯色，說明標記抗體不能與抗原結合，從而被洗脫，該捕獲抗體與標記抗體不是配對抗體。如果選擇的兩種單克隆抗體不能進行配對，則需重新選擇兩種單抗，重新進行試驗，直至找出可以配對的抗體。

 配對抗體的應用

利用雙抗夾心法對目的抗原進行定性定量的檢測，必須要用到可以同時與目的抗原結合的配對抗體。對于比較常見的目的抗原，可以通過購買試劑盒的方式得到相應配對抗體。但是市面上試劑盒的種類有限，有些目的蛋白在市面上無法買到對應的試劑盒，為了進行雙抗夾心法 ELISA 實驗，需進行相應的配對抗體的生產。