分子生物試劑中的BCA蛋白濃度測定試劑是根據目前常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一BCA法研制而成，實現了蛋白濃度測定的簡單，高穩定性，高靈敏度和高兼容性。BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響，可兼容樣品中高達5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20，60，80。但受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA低于10mM，無EGTA，二硫蘇糖醇低于1mM，β-巰基乙醇低于1mM。
此外，蛋白質還可用雙縮脲試劑來檢測。雙縮脲試劑是一個用于鑒定蛋白質的分子生物試劑。它是一個堿性的含銅試液，呈藍色，由0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制，遇到蛋白質顯紫色。
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此也能與銅離子在堿性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時(多肽)，試液中的銅與多肽配位，絡合物呈紫色。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。
雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅，而氫氧化鉀僅僅是為了提供堿性環境，因此它可被其他堿，如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀，會延長試劑的使用壽命。酒石酸鉀鈉的作用是保護反應生成的絡離子不被析出變為沉淀，從而使試劑失效。
您的位置：
在線交流
咨詢電話