噬菌體(ti)(ti)(ti)展示技術將基因(yin)型和表型統(tong)一于同一噬菌體(ti)(ti)(ti)顆粒,相較于傳統(tong)的抗體(ti)(ti)(ti)制(zhi)備(bei)技術,提供了不經免疫(yi)制(zhi)備(bei)抗體(ti)(ti)(ti)的可能,可以(yi)解(jie)決因(yin)為弱抗原(yuan)、自身抗原(yuan)、具有毒性的抗原(yuan)等抗體(ti)(ti)(ti)制(zhi)備(bei)的困難。因(yin)此也(ye)是目前抗體(ti)(ti)(ti)庫制(zhi)備(bei)中應(ying)用十分廣泛的一項(xiang)技術。
一個好的(de)噬菌體抗(kang)體庫(ku)需要具備(bei)較大(da)的(de)容(rong)量(liang)和良好的(de)多樣性,如(ru)果庫(ku)容(rong)量(liang)較小,則難以獲得高親(qin)和力的(de)抗(kang)體。那(nei)么想要獲得較大(da)庫(ku)容(rong)和多樣性豐富的(de)噬菌體文庫(ku),有哪(na)些可以優化的(de)因(yin)素呢(ni)?
一(yi)、選(xuan)擇高轉化效率的大腸桿菌(感(gan)受態細胞(bao))
噬(shi)菌體(ti)文庫(ku)的(de)庫(ku)容(rong)會受大腸桿菌轉化(hua)(hua)效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)的(de)限(xian)制,選擇高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)的(de)電轉感受態(tai)細胞(bao),能有效(xiao)(xiao)(xiao)的(de)增(zeng)加噬(shi)菌體(ti)文庫(ku)的(de)庫(ku)容(rong),另外也可以通過(guo)增(zeng)加轉化(hua)(hua)次數來累積庫(ku)容(rong)。在噬(shi)菌體(ti)展示(shi)文庫(ku)構建過(guo)程中(zhong),使用比較多的(de)感受態(tai)細胞(bao)有TG1、XL1-Blue、SS320等。
在進行轉(zhuan)化實驗時(shi),要想獲得高(gao)的(de)轉(zhuan)化效(xiao)率,質(zhi)粒(li)/連接產(chan)物的(de)純度、電(dian)轉(zhuan)的(de)條(tiao)件、質(zhi)粒(li)/連接產(chan)物的(de)加入量以及操作的(de)規(gui)范性也(ye)是需要注意(yi)的(de)地方。