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多層囊泡 (MLV) 的制備

發布時間: 2022-10-24  點擊次數: 490次

 

以下(xia)是(shi)用(yong)于制備脂(zhi)質體的凍干(gan)(冷凍干(gan)燥)脂(zhi)質混(hun)合物的方案的簡(jian)要概述:

  1. 將脂(zhi)質(zhi)溶解在氯仿中。

  2. 以適當的比例混合(he)脂質。

  3. 使用干(gan)燥(zao)氮氣(qi)流小心(xin)蒸發有機(ji)溶劑(ji)。

  4. 將脂質混合(he)物重新懸浮在(zai)環己烷中。如果混合物未(wei)全部溶解(jie)在環己烷中,則添加(jia)少(shao)量乙醇(環己烷體(ti)積的 1-2%)。不(bu)要使用(yong)過(guo)(guo)多(duo)的乙醇,因為過(guo)(guo)量的乙醇不(bu)會(hui)使溶液凍結。

  5. 使用干冰冷(leng)凍環(huan)己烷溶(rong)液。

  6. 快(kuai)速將冷凍(dong)混合(he)物置于高真(zhen)空(kong)系(xi)統(凍(dong)干系(xi)統)上。一般(ban)來說,“室(shi)內真空(kong)"系統對于這個過程(cheng)來說不(bu)夠強大。樣品應保持冷(leng)凍狀態直至全部干燥(zao);如果(guo)樣(yang)品開始(shi)解(jie)凍,則可(ke)能是真空不夠強(qiang),或者存在太(tai)多乙醇(chun)。解凍的樣品(pin)不會產生(sheng)白色(se)粉末,并且可能會從小瓶中隆起或起泡。

  7. 將樣(yang)品(pin)(pin)放在真空系統(tong)上(shang) 3-5 小時(取(qu)決(jue)于(yu)使用的環(huan)己烷量)或直(zhi)到樣(yang)品(pin)(pin)全部干燥(從(cong)真空中取(qu)出時,小瓶摸起(qi)來或環(huan)己烷的氣味(wei)不應感覺冷)。注意:這會產生干(gan)燥的(de)白(bai)色(se)粉(fen)末,很(hen)容易(yi)懸浮在水中。另(ling)一種(zhong)方法是使用適當(dang)的水性緩沖(chong)液重新懸浮通(tong)過蒸(zheng)發氯(lv)仿而產生的脂質膜。

  8. 將脂(zhi)質混(hun)合物(wu)懸浮在(zai)(zai)水性(xing)緩沖液中(緩沖液溫(wen)度應高于脂(zhi)質的相變(bian)溫(wen)度),并讓混(hun)合物(wu)在(zai)(zai)脂(zhi)質的相變(bian)溫(wen)度以上水合 30-60 分鐘(偶爾渦旋)。該過(guo)程產生大的多層囊(nang)泡(LMV 或 MLV)。對(dui)于(yu)(yu)要(yao)包埋的水溶性化(hua)合(he)物,遵(zun)循相(xiang)同的方(fang)案(an),不同之(zhi)處(chu)在于(yu)(yu)將(jiang)化(hua)合(he)物溶解在用于(yu)(yu)重(zhong)構干脂質的水性緩沖液(ye)中,并且(qie)通過凝膠(jiao)過濾除去(qu)外部化(hua)合(he)物(未封裝的)。

參考

Frank Szoka, Jr. 和(he) Demetrios Papahadjopoulos,(1980),“脂質囊泡(脂質體(ti))的比較特性(xing)和(he)制(zhi)備(bei)方(fang)法",Ann。生物(wu)物(wu)理(li)學牧師。生物(wu)工程。,9:467-508。