細胞(bao)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)是(shi)細胞(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)學實驗(yan)室中常見的(de)情形。細胞(bao)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)通常分(fen)為微生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)和(he)真核生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)。微生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)指的(de)是(shi)真菌(jun)、細菌(jun)、支原(yuan)體等的(de)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)。微生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)容易辨識，可(ke)通過肉眼和(he)利用顯(xian)(xian)微鏡觀(guan)察(cha)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)顏色(se)變化進行(xing)判斷。細菌(jun)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)通常使培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)變黃，且顯(xian)(xian)微鏡下有(you)小黑點(dian)，酵母(mu)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)變紫色(se)，顯(xian)(xian)微鏡下可(ke)見透明成(cheng)串的(de)圓(yuan)形斑。但支原(yuan)體污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)較難看出，因(yin)為支原(yuan)體的(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長較慢(man)，因(yin)此很(hen)容易被忽(hu)略。真核生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)是(shi)由于實驗(yan)員操作(zuo)不(bu)當(dang)發生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)的(de)細胞(bao)系(xi)之間的(de)交叉污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)。為避免細胞(bao)污(wu)(wu)(wu)染(ran)(ran)(ran)(ran)造成(cheng)深遠的(de)影響，細胞(bao)鑒(jian)定萬不(bu)可(ke)少。

細胞系的鑒定主要圍繞四個方面進行：

1、種(zhong)系來源(yuan)：常用技術包括STR分(fen)型，限(xian)制片段(duan)長度(du)多態性（AFLP），染色體組分(fen)析，同工酶分(fen)析，人淋巴細胞抗(kang)原（HLA）分(fen)型。STR分(fen)型是重要(yao)的種(zhong)系來源(yuan)判(pan)斷手段(duan)。STR位點，又被稱為微衛星，是3-7 bp的短串聯重復序列，具有(you)高度(du)多態性，被稱為細胞的DNA圖譜指(zhi)紋，因此可以進行STR分(fen)型，通過(guo)與專業數據庫比對，判(pan)斷樣本所(suo)屬細胞系。

2、組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)：常用技術包括(kuo)形態(tai)學手(shou)段、免(mian)疫組(zu)化(hua)分析。形態(tai)學手(shou)段是利用不同組(zu)織(zhi)可能具有(you)特(te)殊的(de)形態(tai)學結構判斷組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)。免(mian)疫組(zu)化(hua)是利用標記(ji)的(de)抗(kang)體定位(wei)組(zu)織(zhi)特(te)異性抗(kang)原來(lai)確(que)定細胞(bao)的(de)組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)。

3、特異性功能(neng)(neng)檢測：根據(ju)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)種類和功能(neng)(neng)，采用特異性指標鑒定細(xi)(xi)胞(bao)(bao)。比如，腺細(xi)(xi)胞(bao)(bao)產(chan)生分泌蛋白(bai)或者激(ji)素。腫(zhong)瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)需要具備腫(zhong)瘤組織的特性。

4、是(shi)否(fou)發生轉化和(he)惡(e)變：常(chang)用技(ji)術包括核(he)(he)型分析(xi)、細(xi)胞生長行為(wei)觀察（是(shi)否(fou)接觸抑制(zhi)）、裸鼠成瘤(liu)實(shi)驗等。核(he)(he)型分析(xi)包括對染(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)數目(mu)、形態(tai)、組成的研究，常(chang)用到染(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)染(ran)(ran)色(se)技(ji)術。核(he)(he)型分析(xi)可(ke)(ke)揭示(shi)染(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)是(shi)否(fou)發生畸變、細(xi)胞功能(neng)、進化活動(dong)和(he)分裂關系。長期傳代可(ke)(ke)能(neng)會(hui)造(zao)成染(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)畸變，因此需(xu)要定期檢查染(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)核(he)(he)型。正常(chang)細(xi)胞在培(pei)養過(guo)程中可(ke)(ke)能(neng)會(hui)轉化，獲(huo)得(de)永(yong)生性或者(zhe)惡(e)型性。因此需(xu)要鑒(jian)定來區(qu)分正常(chang)細(xi)胞或者(zhe)腫瘤(liu)細(xi)胞。

腫瘤細胞鑒定

對于腫(zhong)(zhong)瘤(liu)(liu)細胞，需要(yao)鑒定其是(shi)否保(bao)留腫(zhong)(zhong)瘤(liu)(liu)組(zu)織的特性，因此需要(yao)進(jin)行一些鑒定步驟，包(bao)括集落(luo)形成實驗(yan)(yan)、成瘤(liu)(liu)性檢測和(he)正常(chang)組(zu)織侵(qin)襲實驗(yan)(yan)等(deng)。

a. 細(xi)胞(bao)集(ji)落(luo)(luo)形成實驗：癌細(xi)胞(bao)株對培養(yang)條件(jian)的(de)適應性較(jiao)強(qiang)、獨立生存(cun)能力(li)也(ye)較(jiao)強(qiang)，細(xi)胞(bao)集(ji)落(luo)(luo)率更高。因此可以通過測(ce)定細(xi)胞(bao)集(ji)落(luo)(luo)形成率，判(pan)斷細(xi)胞(bao)的(de)生長能力(li)，從而判(pan)定是否為無限細(xi)胞(bao)系。

b. 成(cheng)瘤性檢(jian)測：將腫瘤細胞注射(she)進入(ru)裸鼠(shu)體(ti)內，檢(jian)測是否能在裸鼠(shu)體(ti)內形成(cheng)腫瘤。

c. 正常組織侵(qin)襲實驗：該(gai)實驗是(shi)檢測腫瘤細胞是(shi)否(fou)對正常組織具有(you)侵(qin)襲和轉移(yi)的(de)能力。

d. 其他：其他還包括對于密度依賴生長特性改變（接(jie)觸(chu)抑(yi)制）、分子(zi)水平(ping)特征(zheng)的鑒定(ding)。接(jie)觸(chu)抑(yi)制是(shi)判(pan)定(ding)腫瘤(liu)和正常細(xi)胞(bao)的重要(yao)依據。

干細胞鑒定

干細(xi)胞的(de)(de)重點是(shi)檢(jian)測細(xi)胞的(de)(de)多能性。常規鑒定方法包(bao)括核型分析(xi)、擬胚(pei)體（EB）形成分析(xi)、三胚(pei)層分化檢(jian)測、堿性磷酸酶染(ran)色、多能性標志(zhi)物(wu)檢(jian)測和畸胎瘤檢(jian)測等(deng)。

a. EB分(fen)化檢測：EBs是(shi)人誘導(dao)多能(neng)干細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)三(san)維聚(ju)集物，即是(shi)干細(xi)(xi)胞(bao)(bao)多能(neng)性的(de)標(biao)志。EB分(fen)化檢測的(de)流(liu)程是(shi)：將EB接種于(yu)含血清的(de)培養基中自發分(fen)化，然后利用流(liu)式檢測三(san)胚(pei)層表面標(biao)志物，判定多能(neng)性。

b. 三胚層分(fen)化檢(jian)測：分(fen)別將(jiang)胚胎干細胞或(huo)者誘導多能干細胞向(xiang)三胚層分(fen)化培養(yang)，分(fen)別檢(jian)測特(te)定胚層的(de)標志物，從而判斷(duan)其多能性。

c. 堿(jian)性磷酸酶（Ap）染(ran)(ran)色(se)：未分(fen)化(hua)的(de)(de)干(gan)細(xi)胞會(hui)高水平表達Ap。通過對固定的(de)(de)干(gan)細(xi)胞染(ran)(ran)色(se)，分(fen)化(hua)的(de)(de)細(xi)胞無(wu)色(se)，未分(fen)化(hua)的(de)(de)細(xi)胞呈現(xian)紫色(se)或(huo)者紅色(se)。Ap染(ran)(ran)色(se)是一(yi)種低(di)成(cheng)本、簡單快(kuai)速(su)的(de)(de)方法。

d. 多能(neng)(neng)性標志物檢測(ce)：未分化狀態(tai)的ES和(he)iPS能(neng)(neng)表(biao)達(da)特定的表(biao)面標志物，包括TRA-1-81、TRA-1-60、SSEA-3、SSEA-4、Nanog、SOX2、Oct4等。

e. 畸胎瘤(liu)(liu)檢測：將一定數(shu)量的干細(xi)胞(bao)注(zhu)射進(jin)入(ru)免疫缺陷小鼠(shu)體內， 4-12周后，多能干細(xi)胞(bao)能生成畸胎瘤(liu)(liu)。畸胎瘤(liu)(liu)包含了三個胚層的組織(zhi)(zhi)，可通(tong)過組織(zhi)(zhi)學(xue)手段檢測。但是(shi)該方法耗時費力，費用大。