問：原代細胞和細胞系有什么區別？

答：原代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)直接(jie)源自組織(zhi)，一(yi)旦培養(yang)，原代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)壽命是有限的(de)(de)(de)(de)。原代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)是理想的(de)(de)(de)(de)，因為它們保(bao)留(liu)了體(ti)內觀察(cha)到的(de)(de)(de)(de)許(xu)多(duo)標記。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系是不(bu)(bu)斷生(sheng)長和(he)復制并(bing)經歷(li)遺傳(chuan)轉(zhuan)化的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)群(qun)，具(ju)有無限的(de)(de)(de)(de)生(sheng)長潛(qian)力(li)。出(chu)于醫學和(he)/或研(yan)究目(mu)的(de)(de)(de)(de)，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系已在體(ti)外維持。細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系可以通過非(fei)常(chang)大量(liang)的(de)(de)(de)(de)傳(chuan)代(dai)培養(yang)進行(xing)培養(yang)，并(bing)且(qie)在非(fei)常(chang)高的(de)(de)(de)(de)傳(chuan)代(dai)次數下可能會(hui)發(fa)生(sheng)進一(yi)步的(de)(de)(de)(de)基(ji)因型/表(biao)型變化。一(yi)般來說，細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系缺乏體(ti)內觀察(cha)到的(de)(de)(de)(de)許(xu)多(duo)標記，并(bing)且(qie)也顯示(shi)出(chu)與原代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)非(fei)常(chang)不(bu)(bu)同的(de)(de)(de)(de)標記譜(pu)。

問：ScienCell 如何確認細(xi)胞類型(xing)？

A. 細胞(bao)(bao)類型可以(yi)通過多(duo)種方式確認。細胞(bao)(bao)形態學非常重要，可以(yi)幫助(zhu)我們識(shi)別正(zheng)確的細胞(bao)(bao)。此外，我們的質量(liang)控(kong)制(zhi)部門使用免疫(yi)熒光(guang)來確認特定細胞(bao)(bao)類型的識(shi)別標(biao)記的存在(zai)。免疫(yi)熒光(guang)也可用于識(shi)別污染細胞(bao)(bao)。

問(wen)：我可以(yi)獲得有關我的(de)批次細胞的(de)哪(na)些(xie)捐贈者信息(xi)？

答：我們保存所有人(ren)類和動(dong)物原代細胞(bao)的(de)記錄。如果您(nin)有特(te)定要(yao)求（年齡和/或性別），請在訂購前聯(lian)系我們的(de)客(ke)戶服(fu)務部門。

問：我(wo)(wo)們是否對我(wo)(wo)們的細(xi)胞(bao)(bao)進行(xing)人類白(bai)細(xi)胞(bao)(bao)抗原(yuan)分型？

答：人類白細胞抗原 (HLA) 分型是一(yi)種確定一(yi)個(ge)人的組織與另一(yi)個(ge)人的組織匹配(pei)程(cheng)度(du)的方法。我們(men)目(mu)前不(bu)在 ScienCell 研究實驗室對此進行(xing)測試。

問：我(wo)的原(yuan)代細胞瓶是否 100% 純？

答：原代細(xi)胞永(yong)遠不(bu)會(hui)是 100% 純的，但是，我們會(hui)盡力(li)獲得(de)盡可能純的細(xi)胞。總是存在(zai)污染細(xi)胞。

問：我需要多少經驗才能開始使用正常(chang)原代細胞？

答：強烈推薦具有在(zai)無菌條件下使用層流罩工作的經(jing)驗(yan)(yan)，并且具有使用其他細胞(bao)類型的經(jing)驗(yan)(yan)是有利的。如果您是細胞(bao)培養的初(chu)學者(zhe)或想建立細胞(bao)培養實驗(yan)(yan)室，我(wo)們(men)可以為您提供幫助。請(qing)聯系(xi)我(wo)們(men)的細胞(bao)培養專家。

問(wen)：收到后我應該如何處(chu)理冷凍保存的細胞(bao)？

A. 收到(dao)包裹后，立(li)即將冷凍保(bao)存(cun)的細(xi)(xi)胞從干(gan)冰運(yun)輸容(rong)器(qi)轉移至液(ye)氮中。快速從運(yun)輸容(rong)器(qi)轉移到(dao)液(ye)氮中，以(yi)防止細(xi)(xi)胞解(jie)凍。請(qing)勿將細(xi)(xi)胞儲(chu)存(cun)在 -20°C 或(huo) -80°C 下，因為這會對細(xi)(xi)胞造成不可(ke)逆轉的損壞。

問：當我(wo)第一次對凍存細胞進行平板培養時(shi)，是否(fou)需要(yao)離(li)心(xin)細胞以去除 DMSO？

答：我們不(bu)建議通過離(li)心細(xi)(xi)胞來(lai)去(qu)除 DMSO 殘留(liu)物。離(li)心過程對細(xi)(xi)胞的危(wei)害可能(neng)比 DMSO 殘留(liu)物更大，特別是如(ru)果(guo)(guo)使用不(bu)適當的高速(su)。當您鋪板(ban)細(xi)(xi)胞時，DMSO 將(jiang)(jiang)(jiang)在(zai)培養(yang)基中充分稀釋。例(li)如(ru)，如(ru)果(guo)(guo)將(jiang)(jiang)(jiang)整個冷(leng)凍管（1 毫升）細(xi)(xi)胞放(fang)入裝有 15 毫升培養(yang)基的 T-75 燒瓶(ping)中，則 DMSO 濃(nong)度(du)將(jiang)(jiang)(jiang)低于 0.67% (v/v)。如(ru)果(guo)(guo)以 5000 - 10,000 個細(xi)(xi)胞/cm2 鋪板(ban)細(xi)(xi)胞，DMSO 的濃(nong)度(du)會更低。

問：我應(ying)該使用什么類型的(de)培(pei)養箱來培(pei)養 ScienCell 原(yuan)代細胞？

我們建議使用 37°C、5% CO ₂培養箱培養來自 ScienCell 的所有原代細胞。所有 ScienCell 培養基都需要 5% CO ₂來維持細胞的最佳 pH 值(zhi)。

問：如何(he)用(yong)冷凍保存的細胞(bao)建(jian)立培養物？

A. 注(zhu)意：詳細說明請參閱電池(chi)產品表。

1. 從液氮中取出一小瓶細(xi)胞，注(zhu)意保護手(shou)和眼睛(jing)。

2. 將小瓶(ping)上(shang)的(de)蓋子(zi)擰松 1/4 圈 10 秒，以釋放可能滯留在(zai)螺紋中的(de)液氮，然后重新擰緊蓋子(zi)。

3. 將(jiang)冷凍小(xiao)瓶放入 37°C 水浴中。握住并輕輕旋轉小(xiao)瓶，直至內容物全部解凍。迅速(su)從(cong)水浴中取出小(xiao)瓶，用 70% 乙醇擦拭，然后轉移(yi)至無菌區(qu)。

4. 小心(xin)地取下蓋(gai)子，不要接觸內螺紋。輕輕地將(jiang)小瓶(ping)中的(de)內容物重新懸浮并分配(pei)到含有培養基的(de)平衡的(de)聚(ju)-L-賴氨酸(suan)或纖(xian)連蛋白包被(bei)的(de)培養容器中（請參閱(yue)產品表上列出的(de)具(ju)體(ti)說明(ming)）。

5. 蓋上培養容器的蓋子或蓋子，輕輕搖(yao)動容器以(yi)使細胞(bao)均勻分布。如有必要，松開蓋子以(yi)進行(xing)氣體交(jiao)換。

6. 將培養容器(qi)放回培養箱（37°C，5% CO2/95% 空氣）。

7. 為了(le)獲得最佳結果，培(pei)養(yang)開始后至少(shao) 16 小時(shi)內不(bu)要擾動培(pei)養(yang)。第二天刷新培(pei)養(yang)基以(yi)去除殘留的 DMSO 和(he)未貼壁的細(xi)胞（除非產品表上另有說明）。

問：我(wo)應該向細胞(bao)培(pei)養瓶中(zhong)添加多少體積的(de)培(pei)養基？

A. 建議在(zai) T-25 燒瓶(ping)(ping)中(zhong)添加(jia) 5 ml 培養基，在(zai) T-75 燒瓶(ping)(ping)中(zhong)添加(jia) 15 ml 培養基，在(zai) T-150 燒瓶(ping)(ping)中(zhong)添加(jia) 30 ml 培養基。

問(wen)：我應該(gai)多久更換一次原代細(xi)胞的細(xi)胞培(pei)養基？

答：請(qing)參閱您正在使用的細(xi)(xi)胞(bao)類型的產品(pin)表以獲取具(ju)體說明(ming)。一(yi)般來(lai)說，根據細(xi)(xi)胞(bao)的融合情況，每 2-3 天(tian)更換一(yi)次培養(yang)基。注意：冷凍(dong)保存(cun)的細(xi)(xi)胞(bao)解凍(dong)并鋪板(ban)后(hou)，應在約(yue) 16 小時后(hou)進行第一(yi)次培養(yang)基更換，以去除 DMSO 殘留和死(si)細(xi)(xi)胞(bao)。

問：我(wo)應該(gai)在(zai)什(shen)么匯合處傳代(dai)細胞？

答(da)：這取決于(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)類型。例如，內(nei)皮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)永遠不應該變得太(tai)匯合(he)（90%-100%），因為這會促(cu)進(jin)污染細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)生(sheng)長(chang)并(bing)(bing)導(dao)致內(nei)皮細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)衰老(lao)。另(ling)一方面，成(cheng)纖維細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)可以在較(jiao)高的(de)匯合(he)度(du)（90%-98%）下進(jin)行傳代(dai)(dai)培養(yang)，并(bing)(bing)且不會受到較(jiao)高匯合(he)度(du)的(de)不利影響。一般(ban)來說，原代(dai)(dai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)不應該變得太(tai)匯合(he)，因為這會導(dao)致細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)衰老(lao)并(bing)(bing)促(cu)進(jin)污染細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)生(sheng)長(chang)。

問：正常原代細胞(bao)的推薦分流比是多少(shao)？

答：ScienCell 研(yan)究實驗室不推薦正常細(xi)胞的(de)分(fen)流(liu)比，因為胰蛋白酶(mei)消(xiao)化后的(de)細(xi)胞數量(liang)各不相(xiang)同。我們建議在胰蛋白酶(mei)消(xiao)化后對(dui)細(xi)胞進行(xing)計數，并按照產品表上針對(dui)特定細(xi)胞類型推薦的(de)接種密度接種細(xi)胞。

問：群體(ti)倍增和傳代次數(shu)有什么區(qu)別(bie)？

答：群(qun)體倍增是指(zhi)培(pei)養物(wu)中細(xi)(xi)胞總數增加(jia)兩(liang)倍，最常在指(zhi)數或“對數"生長階段(duan)提及。術語傳(chuan)代次數是指(zhi)將細(xi)(xi)胞群(qun)從培(pei)養容器中取出并進行傳(chuan)代培(pei)養（傳(chuan)代）過程的次數，以保持細(xi)(xi)胞處于(yu)足夠(gou)低(di)的密度(du)以刺激進一步生長。

問(wen)：我可(ke)以使用正常原代(dai)(dai)細胞進行(xing)多少次傳代(dai)(dai)？

答：ScienCell 不使用術(shu)語“傳代"來描述增長潛力，因為每個客戶(hu)使用不同的分流(liu)比。ScienCell 研究實驗(yan)室在細胞產品表上標出了預期的群(qun)體倍(bei)增次數。

問：非增殖細胞可以傳代(dai)培(pei)養(yang)嗎？

A. 非增殖(zhi)細胞(bao)(bao)不(bu)能(neng)進(jin)行傳代(dai)培養，因為它們不(bu)增殖(zhi)。這(zhe)包括以(yi)下細胞(bao)(bao)類型(xing)(xing)：神經元、小膠(jiao)質細胞(bao)(bao)、巨噬細胞(bao)(bao)和其他一些細胞(bao)(bao)類型(xing)(xing)。產品表將表明(ming)細胞(bao)(bao)是(shi)否不(bu)增殖(zhi)。

問：我可以重(zhong)新冷凍 ScienCell 的正常原代(dai)細(xi)胞嗎(ma)？

答：我們不建議客戶重新冷凍 ScienCell 的人(ren)類和動物(wu)原代細胞。

北京和一生物(wu)科技有(you)限公司專業代理(li)antibodiesinc全(quan)系(xi)列產品(pin)，專營進口生物(wu)試劑，科學儀器(qi)，實驗消耗品(pin)，化工(gong)原料及藥物(wu)中間(jian)體等(deng)。公司與諸多國外品(pin)牌簽下代(dai)理，sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等，能為(wei)廣大科研用戶提供(gong)數萬種試劑(ji)、儀器(qi)和實驗(yan)消耗品。

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