盡管沒(mei)有“路線圖"詳細(xi)說明(ming)獲(huo)得監管部門批準進(jin)入(ru)臨床所需的(de)研究，但??FDA、EMA 和 PMDA 最(zui)近發(fa)布的文件強調(diao)了 候(hou)選藥物的代(dai)謝和藥物相(xiang)互作用 (DDI)的潛力(li)。

FDA 2020 年最(zui)終確(que)定(ding)的(de)行(xing)業指南強(qiang)調了(le)臨床前(qian)開發中 DDI 成分(fen)的(de)重要性和標準(zhun)化，指出(chu)“對 DDI 的(de)研究不充分(fen)可能會阻礙 FDA 確(que)定(ding)研究藥物的(de)益處(chu)和風險的(de)能力，并(bing)可能導致限制性標簽、上市后要求或(huo)承諾(nuo)"和/或(huo)推遲(chi)批準(zhun)，直到獲得有(you)關 DDI 的(de)足夠信息。"? 

臨(lin)床前數據包中藥物(wu)相互作用(yong)研究(jiu)的目的是(shi)通過(guo)基于風險的方法預(yu)測與(yu)伴(ban)隨藥物(wu)發生有害相互作用(yong)的可能性，從而防止患(huan)者不必要地被(bei)排除在臨(lin)床試驗之外。 ;

監管(guan)機構(gou)已發布了(le)關(guan)(guan)鍵指導(dao)文件(jian)，供藥(yao)物開(kai)發商用于(yu)規劃這(zhe)些關(guan)(guan)鍵的臨(lin)床(chuang)前檢測。例如，2020 年 1 月(yue)，FDA 發布了行業最終指南“體外代謝和(he)轉運蛋(dan)白介導的藥物(wu)相互作用研(yan)究"，其重(zhong)點是?體外實驗(yan)，以評估涉及藥物(wu)代謝酶和轉運蛋白的(de) DDI 潛力。體外結果如何以基于(yu)風險(xian)的(de)方法為(wei)臨床 DDI 研究計劃提供信息。最(zui)終指南(nan)是 2017 年指南(nan)草案的(de)更(geng)新(xin)。全球三大主要機構（FDA、EMA、PMDA）之間的(de)(de)期望差異以(yi)及(ji) 2017 年至 2020 年 FDA 指南的(de)(de)具體(ti)更新可以(yi)從Brian Ogilvie 博(bo)士和 XenoTech 創(chuang)始人 Andrew Parkinson 博(bo)士 ?制作的?2020 年海報中看出?。

基本體外(wai) DDI 研究： 

• 血(xue)漿蛋白(bai)結合

• 滲透性

• 代謝穩定性

• 代謝物(wu)鑒定(ding)（Met ID）

• 反應表型分析

• CYP酶抑制(zhi)

• CYP酶誘導

• 藥物轉(zhuan)運蛋白抑(yi)制

• 藥(yao)物轉(zhuan)運底(di)物

初(chu)步測定： 

研究：?血漿蛋白(bai)結合

目的：?確(que)定血漿中(zhong)可用于人(ren)類和(he)臨床前物(wu)種的(de)靶標和(he)脫靶相互作(zuo)用的(de)結合藥物(wu)和(he)游離藥物(wu)的(de)百分比 

體外研究(jiu)期望： ?“在開始人體臨床試驗之前，通常應評估動物和人類的體外代謝和血漿蛋白結合數據以及用于重復劑量毒性研究的物種的全身暴露數據。" ¹

研究： 滲(shen)透性(xing)

目的：?測(ce)量滲透性以預測(ce)腸道吸收和組織分(fen)布 

體外研究預(yu)期：?研究人員(yuan)測量測試(shi)物品跨細胞系（例如(ru)(ru) Caco-2 或 MDCKII 細胞）或人工(gong)膜（例如(ru)(ru) PAMPA）的滲(shen)透(tou)性(xing)，并與高滲(shen)透(tou)性(xing)和低滲(shen)透(tou)性(xing)對照進行比較(jiao)。 

研(yan)究： 代謝穩定性

目的(de)：?測量(liang)人類和臨床(chuang)前物(wu)種的體外內在清除率 

體外研究預期：?將測試品與混合的微粒體(ti)、S9、血漿(jiang)或肝細胞一起孵育，以(yi)確定(ding)清除(chu)率。經(jing)過處理的測試系(xi)統(tong)用于比較母(mu)體化(hua)合物與(yu)藥物代謝(xie)酶相互作用之前和之后的濃度，以確(que)定(ding)細(xi)胞/細(xi)胞器內是(shi)否存在顯(xian)著(zhu)的代謝(xie)。 

研(yan)究(jiu)：?代謝(xie)物表征/鑒定 (Met ID)

目的(de)： ?“確定藥物產生的代謝物的數量和結構，以及代謝途徑是平行的還是順序的" 

體外研(yan)究期望： ?FDA 建議盡早進行代謝物表征和鑒定（“我們鼓勵在藥物開發過程中盡早鑒定用于非臨床安全評估的動物與人類之間藥物代謝的任何差異。" ²）建議(yi)的測試系統包括(kuo)人肝細胞、人肝微粒(li)體或(huo)重組酶系統。 

代謝(xie)介(jie)導的藥物相(xiang)互作用： 

研(yan)究(jiu)：?反應表(biao)型

目的： ?“確定研究藥物是否是代謝酶的底物" 

體外研(yan)究期望：?在兩個都認可的測(ce)試系統中監(jian)測(ce)底物損失(shi)或代謝物形成的有效方(fang)法。申辦者“應該(gai)同時使用"經過驗證的、可重復的分析方法：人肝微(wei)粒體(ti)（+10 名供體(ti)）、人重組 CYP 酶。如果某種酶對(dui)藥物消(xiao)除的(de)貢獻率>25%，則需要進行臨床 DDI 研究(jiu)。 

標(biao)準：主(zhu)要細胞色素(su) P450 酶（CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5） 

如果合適(shi)的話，還(huan)可以添加(jia)：其他 CYP（CYP2A6、CYP2J2、CYP4F2、CYP2E1）、I 期酶（MAO、FMO、XO、AO）、II 期酶（UGT） 

研究：? CYP 酶抑(yi)制

目的： ?“確定研究藥物是否是代謝酶的抑制劑" 

體外研究預期：?對 7 個主(zhu)要 CYP（CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5）具有可逆（直接）和 TDI（時間依賴性(xing)抑制）。測試(shi)系統(tong)包括人(ren)肝微(wei)粒體、重組CYP表達(da)系統(tong)的微(wei)粒體、肝細胞。 

研究(jiu)： CYP?酶誘導

目(mu)的： ?“確定研究藥物是否是代謝酶的誘導劑" 

體(ti)外研究預期：  標(biao)準：主要(yao) CYP（CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4/5）的誘導潛(qian)力 

如果(guo)合適的話，還(huan)可以補充(chong)：如果(guo) CYP3A4/5 產生陽性誘導結果(guo)，則跟(gen)進(jin) CYP2C 家族（CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19） 

測試系統包括來自(zi)至少三個供(gong)體的(de)可平板冷(leng)凍保存或(huo)(huo)新鮮(xian)分離的(de)人(ren)肝細胞或(huo)(huo)永生化肝細胞。 

轉運蛋白介導的藥物(wu)相互作用： 

研究： 藥物轉運蛋白抑(yi)制

目的：? “確定研究藥物是否是轉運蛋白的抑制劑" 

體(ti)外研究預期：?轉(zhuan)(zhuan)運(yun)蛋(dan)白研究的時(shi)間建(jian)議(yi)可(ke)能會根(gen)(gen)據化合物的分子特性而有所不同（“每種轉(zhuan)(zhuan)運(yun)蛋(dan)白的體外(wai)評估時(shi)間可(ke)能會根(gen)(gen)據研究藥物的治療(liao)適應癥而有所不同"）以及當前的指導建(jian)議(yi)針對每種轉(zhuan)(zhuan)運(yun)蛋(dan)白類型使用(yong)不同的測(ce)試系(xi)統。 

標準：P-gp、BCRP、OATP1B1、OATP1B3、OCT2、MATE1、MATE2-K、OAT1、OAT3 

附加（如果適用）：BSEP、OCT1 ³

研究：?藥物轉運(yun)蛋白(bai)底物

目的： ?“確定研究藥物是否是轉運蛋白的底物" 

體(ti)外研究預期：   ABC/外排：P-gp和BCRP（但不推薦用于高溶解性、高滲透性藥物） 

SLC/攝(she)取(qu)：如果肝臟（OATP1B1、OATP1B3）和(he)腎(shen)臟（OAT1、OAT3、OCT2、MATE1、MATE2-K）底物電位表(biao)明肝臟攝(she)取(qu)/消除，則應根(gen)據 ADME（吸收(shou)、分(fen)布、代謝、排(pai)泄(xie)）數據進(jin)行評估(gu)或腎(shen)分(fen)泌顯著(zhu)。