CUBIC Trial Kit是一款(kuan)用于透明化(hua)技術CUBIC（Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational analysis）的試(shi)劑盒。

該(gai)方法由上(shang)田泰(tai)己教授(shou)和洲崎(qi)悅生教授(shou)等人開發。

只需(xu)將組(zu)織浸入試劑盒(he)包含的(de)溶(rong)液中，即可對(dui)小鼠大(da)腦(nao)和全(quan)組(zu)織、靈(ling)長(chang)類的(de)全(quan)腦(nao)和甲(jia)殼類的(de)全(quan)組(zu)織進(jin)行(xing)透明化(hua)處(chu)理(li)和折(zhe)射率調整。

該方法有望應(ying)用(yong)于病理(li)學研(yan)究和單細胞(bao)水平(ping)中的觀察。

數據(ju)提供：

國立研究(jiu)開發法人理化學(xue)研究(jiu)所上田(tian)泰己教(jiao)授、洲崎悅生教(jiao)授

◆CUBIC特點

● 操作簡單（只需(xu)浸入溶液）

● 可(ke)透明化整個(ge)器官

● 小鼠全腦透明化只需兩(liang)周(zhou)

可進行透(tou)明化的組織(zhi)

小鼠(shu)大(da)腦和(he)全(quan)(quan)組(zu)織，靈(ling)長(chang)類(lei)全(quan)(quan)腦，魚類(lei)、甲殼(ke)類(lei)、甲蟲等(deng)的全(quan)(quan)組(zu)織，骨(gu)骼（需進行脫鈣處理）

CUBIC Trial Kit試劑盒組成

1. ScaleCUBIC-1 Solution——250 mL x 1支(zhi)

2. ScaleCUBIC-2 Solution——250 mL x 1支

3. Mounting Solution-1——40 mL x 1支

4. Mounting Solution-2——40 mL x 1支

透明(ming)化處(chu)理需(xu)準備

▼ 試劑：

1. CUBIC Trial Kit

2. 多聚甲(jia)醛（產品編號：160-16061）

3. PBS×1（產品編號：164-25511）

▼ 實驗用具(ju)：

1. 5 mL/15 mL/30 mL/50 mL錐形(xing)管（配合樣(yang)品使(shi)用）

2. 搖床

3. 用(yong)于觀察CUBIC透(tou)明化(hua)樣(yang)品的熒光(guang)顯微鏡(jing)※和推薦物(wu)鏡(jing)※※

※共聚焦顯(xian)微鏡(jing)、雙(shuang)光(guang)子顯(xian)微鏡(jing)、光(guang)片(pian)顯(xian)微鏡(jing)

※※與(yu)折射率 (RI=1.49)相匹配的物鏡(jing)。

建議在使(shi)用之前咨詢顯微(wei)鏡制(zhi)造商。

◆CUBIC實驗方案事例(li)

透明化實驗方案示例（完整器官）

請注(zhu)意，組織透明(ming)化(hua)實驗方案(an)中(zhong)所用試劑用量、處理時間需(xu)根據(ju)樣品(pin)(pin)尺寸進行(xing)調(diao)整。此外(wai)，建議在灌(guan)注(zhu)固(gu)(gu)定后，取出并重(zhong)新固(gu)(gu)定樣品(pin)(pin)。

各個(ge)步驟中(zhong)使用的試(shi)劑(ji)量約為(wei)12-15 mL，清洗(xi)時建議使用試(shi)劑(ji)量的5-10倍。

*每(mei)2天更換新溶液

**建議以2 : 8、3：7的(de)比例混合 (RI = ～1.49) 試劑盒中的(de)Mouting Solution 1 和 2 使用

免疫組織染色實驗方案示例

腦組織塊(kuai)的免(mian)疫染色案例，詳(xiang)細實驗方案請見參考文獻（1）

*每(mei)2天更換新(xin)溶(rong)液

**分別用以下溶(rong)液稀(xi)釋抗體

一抗：0.1% (v/v) Triton X-100, 0.5% (w/v) bovine serum albumin, 0.01% (w/v) sodium azide in PBS

二(er)抗(kang)：0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1% (w/v) bovine serum albumin, 0.01% (w/v) sodium azide in PBS

***建議以2 : 8、3：7的(de)比例混(hun)合 (RI = ～1.49) 試劑盒中的(de)Mouting Solution 1 和 2 使用。