Teknova
Teknova產品線包括(kuo)用于進行細菌、酵母和(he)真(zhen)(zhen)菌培(pei)養基的(de)瓊(qiong)脂板,用于酸堿、添加劑(ji)、酒(jiu)精、洗(xi)滌劑(ji)、表(biao)面活性劑(ji)、鹽溶液(ye)、生(sheng)物緩(huan)沖液(ye)在內(nei)的(de)多種緩(huan)沖液(ye)和(he)試劑(ji)、用于添加劑(ji)、細菌真(zhen)(zhen)菌培(pei)養等(deng)方面的(de)凍干粉、微生(sheng)物培(pei)養基、PCR認證水、試劑(ji)水以及(ji)(ji)EFI級優質(zhi)水等(deng),同時還提供AAVTak解決方案,包括(kuo)用于pcr擴增(zeng)的(de)試劑(ji)盒、AAV穩定(ding)劑(ji)以及(ji)(ji)AEX緩(huan)沖液(ye)篩(shai)選試劑(ji)盒。
1、細胞(bao)培養基
細菌培(pei)(pei)養(yang)基(ji)設計(ji)用于在受控(kong)環境(jing)中培(pei)(pei)養(yang)細菌。Teknova的培(pei)(pei)養(yang)基(ji)種(zhong)類繁(fan)多,從LB、TB和SOC等標準培(pei)(pei)養(yang)基(ji)到化(hua)學成分(fen)明確、無動(dong)物成分(fen)和動(dong)物源性培(pei)(pei)養(yang)基(ji)。
2、緩沖液和試劑
Taknova具有超27年復雜的配(pei)方開發經(jing)驗,可以提(ti)供各種高質量、縣城緩沖液以及試(shi)劑。
3、干粉
Taknova干粉種(zhong)類繁(fan)多(duo),從預混(hun)培養(yang)基(ji)到瓊脂、抗生素、X-Gal 和 IPTG 等原材料。它們可以用(yong)水快(kuai)速復溶(rong),并有多(duo)種(zhong)形(xing)式(shi)可供選擇(ze),包括方便水合作用(yong)和混(hun)合的袋子。
4、微生(sheng)物培養基
包(bao)括 LB、Terrific Broth 和 EZ 培(pei)養基。我(wo)們(men)的即用型解決方(fang)案有管(guan)、瓶和袋(dai)裝,包(bao)括您需要的抗(kang)生(sheng)素(su),從羧芐西(xi)林到卡那(nei)霉素(su)和氨芐西(xi)林。同(tong)時培(pei)養基無動物成分,質(zhi)量控制嚴格,確保(bao)試驗的可(ke)重復(fu)性。
5、AAV解決方(fang)案
AAV上游(you)研究(jiu)(jiu)包括細(xi)胞擴增和轉(zhuan)染、細(xi)胞裂解和核酸內切酶處理兩個過程(cheng)(cheng)。下游(you)研究(jiu)(jiu)包括過濾、捕獲(huo)、拋光、存儲這幾個過程(cheng)(cheng)。
5.1 細胞擴(kuo)增和轉染試劑優(you)化(hua):
TAKnova對傳統的(de)細胞(bao)擴增和(he)轉染(ran)試劑(ji)進行(xing)優化,新的(de)試劑(ji)能夠有(you)效提升(sheng)產(chan)品的(de)性能,細胞(bao)生長(chang)質(zhi)量以(yi)及AAV的(de)產(chan)量都得到了進一步提升(sheng)。
性能檢測:
測試了五種不同的培(pei)養(yang)(yang)基類型(xing)用于細胞生長和(he) AAV 病毒生成。所(suo)有培(pei)養(yang)(yang)基類型(xing)均呈指(zhi)數級(ji)增長,培(pei)養(yang)(yang)基類型(xing)A的細胞生長和(he)AAV產量比(bi)其他的類型(xing)高。
小規模(30ml)測試了七(qi)種(zhong)(zhong)不同的(de)轉染試劑(ji),以確定哪(na)種(zhong)(zhong)試劑(ji)產(chan)生的(de)AAV滴度(du)比較好(hao)。在七(qi)種(zhong)(zhong)中(zhong)(zhong),有四種(zhong)(zhong)被選(xuan)中(zhong)(zhong)并放大(350毫(hao)升(sheng))用于AAV生產(chan)。試劑(ji) F 在血清型中(zhong)(zhong)具(ju)有較好(hao)的(de) AAV 滴度(du)。
高效的(de)細胞裂解(jie)和核酸內切酶處理對于保(bao)持高 AAV 產量和純度至關重要。Teknova已經驗證了多(duo)種尺寸的(de)細胞裂解(jie)緩沖液以(yi)(yi)及苯甲酸酶核酸酶,可減(jian)少與產品相關的(de)雜質,如殘留的(de)宿主(zhu)細胞DNA和質粒,以(yi)(yi)滿足各種生物反應(ying)器需求。
5.2 細胞裂解和(he)核(he)酸內切酶試劑:
Teknova的(de)哺(bu)乳(ru)動物細(xi)(xi)胞裂解(jie)(jie)緩沖(chong)液是一種基于聚山梨酯 20 的(de)細(xi)(xi)胞裂解(jie)(jie)試劑,濃(nong)度(du)為(wei) 10X。100 mL 體(ti)積足以(yi)收獲(huo) 1 L 細(xi)(xi)胞培養物,500 mL 體(ti)積足以(yi)收獲(huo) 5 L 細(xi)(xi)胞培養物。
5.3過濾(lv)試劑:
Teknova通過使用與血清型(xing)無關的(de)過濾(lv)緩沖(chong)(chong)液,保護 AAV 顆粒(li)的(de)完整性,同時去除顆粒(li)污染物(wu)。Teknova的(de)AAV過濾(lv)緩沖(chong)(chong)液既可(ke)以用作(zuo)深(shen)層(ceng)過濾(lv)膜(mo)(mo)的(de)平衡緩沖(chong)(chong)液,也(ye)可(ke)以用作(zuo)深(shen)層(ceng)過濾(lv)膜(mo)(mo)的(de)追逐(zhu)緩沖(chong)(chong)液, AAV穩定劑可(ke)以降(jiang)低過濾(lv)過程中(zhong)的(de)濁度和壓力,防止聚(ju)集,并(bing)顯(xian)著提高功能性衣殼的(de)回收率。
5.4 捕獲試劑:
獲(huo)取 AAV 捕獲(huo)步驟所(suo)需(xu)的(de)所(suo)有親和(he)緩沖液和(he)試劑,包(bao)括(kuo)平衡、洗滌、CIP、儲存、中和(he)和(he)電導率調節解決(jue)方案。Teknova的(de) AAV 親和(he)緩沖液試劑盒(he)也可(ke)單獨提(ti)供,通過使用 AAV 穩定(ding)劑,通促進(jin)色譜過程(cheng)中的(de)單分散和(he)減(jian)少剪切壓(ya)力引(yin)起的(de)結(jie)構(gou)完整性損失,進(jin)而保護衣殼的(de)完整性。
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