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WAKO的產品介紹

發布時間: 2023-12-03  點擊次數: 20次

 

本產品(pin)是(shi)可(ke)在短(duan)時間內提取哺乳(ru)動物組織以(yi)及(ji)細胞內的(de)線粒體DNA(mtDNA)的(de)試劑(ji)盒。此外,還可(ke)用于從復合(he)飼料中(zhong)提取mtDNA。

◆特點
● 只需少(shao)量組織樣品(5 mg),即可提取(qu)適用于PCR反應(ying)的mtDNA。
 從50 mg組(zu)織(250 mg骨骼肌)中提取(qu)的mtDNA可(ke)通過瓊脂糖凝膠電泳確認(ren)。
 所提取的mtDNA純度高,后續可用于PCR和限制性內切酶酶切分析。
 可從冷凍組織中提取mtDNA。
 無需添加如苯酚、氯仿等有機溶劑。

◆原理
1. 通過離心(xin)從細胞裂(lie)解液(ye)中獲(huo)得(de)線粒(li)體斷片(pian)。
2. 為(wei)除去線粒(li)體(ti)斷片中(zhong)的基因組DNA,本試(shi)劑(ji)盒采用質粒DNA純化中的堿(jian)-SDS方法,通過使基(ji)因(yin)組DNA堿(jian)發(fa)生變性并沉淀析出后,回收mtDNA(環狀DNA)。
3. 使用碘化鈉令(ling)混入的(de)蛋白(bai)質(zhi)等(deng)變為(wei)可溶性物質(zhi),再通過洗滌緩(huan)沖液純化(hua)mtDNA。

◆試(shi)劑盒(he)組成
1. Buffer for Homogenate(勻漿緩(huan)沖(chong)液)
2. DNA Extraction Solution 1
3. DNA Extraction Solution 2(A)
4. DNA Extraction Solution 2(B)
5. DNA Extraction Solution 3
6. 碘(dian)化(hua)鈉溶(rong)液
7. 洗滌(di)液

◆實驗流程

◆實(shi)驗示例
從小鼠的新鮮(xian)組織(zhi)以及冷凍組織(zhi)中(zhong)提取mtDNA

從小鼠(shu)的新鮮組(zu)織中提取的mtDNA,取其中一半用Pst l處理,通過瓊脂糖(tang)凝膠電泳進行確認。

從小鼠的冷凍組織中提取的mtDNA,取其中一半用Pst l處理,通過瓊脂糖凝膠電泳進行確認。

◆使用過程(cheng)中的注意(yi)事(shi)項
由于使用本試劑盒(he)提取(qu)的mtDNA量(liang)較少,因此需要通過GelRed™ 染色才(cai)能在凝膠上被檢(jian)測出(chu)來。本試劑(ji)盒無法用(yong)于溴化乙錠染色檢(jian)測。

◆產(chan)品列表

※ 僅(jin)供實(shi)驗(yan)研究用,不可用于臨床診(zhen)斷。