ATCC細胞的細胞培養液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩定的pH，培養液中一般有一個pH緩沖系統，同時常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養液中一般需要加入一定量的血清。
ATCC細胞培養液中的氨基酸除了13種細胞生長所必須的氨基酸外，往往加入一些非必需的氨基酸以促進細胞的生長。在必需的氨基酸中，L-谷氨酰胺在溶液中不穩定（在4℃培養溶液中半衰期為3個星期，37℃中為1個星期），需要在使用時加入。所有培養器皿均需清水沖洗2-3d，達兩次ddH2O，每遍洗刷3-4次，加塞包裝，置于烤箱中干燥消毒，于培養前1天進行。
ATCC細胞培養液的配制明細：
1.解剖液：以無機鹽（去除Ca2+，Mg2+）加葡萄糖配制成PBS緩沖液，保持一定的滲透壓和pH值。
2.基礎培養基（MEM）：主要為多種氨基酸，加入葡萄糖，雙蒸餾水溶解。
3.接種培養液：用于胰酶消化后的細胞分散，做成細胞懸液，其成分為MEM含1%谷氨酰胺，另加入10%馬血清，當天配制。
4.維持培養液：接種后24h，全部換成此液，后每2周換一次，每次換1/2。其成分為MEM中含5%馬血清，1%谷氨酰胺，及適量的支持性營養物質。
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