第一種：接種率測試

進行接種率測試(shi)可以(yi)優化出一個最合適的(de)血清使用濃度。可以(yi)把新到(dao)批次的(de)血清按不同的(de)濃度比例配制成血清細胞培養基，例如5%、10%、15%和20%濃度的(de)血清細胞培養基。然(ran)后以(yi)10-100個細胞/mL的濃(nong)度進行接(jie)種(zhong)，并分別使用上(shang)述不同血清濃(nong)度的血清細胞培(pei)養(yang)(yang)基進行培(pei)養(yang)(yang)2周，觀察細胞(bao)的(de)(de)(de)不同濃(nong)度下的(de)(de)(de)細胞(bao)存活(huo)率以及細胞(bao)集落的(de)(de)(de)面積變(bian)化，從而得出一個(ge)最合適的(de)(de)(de)血(xue)清濃(nong)度。

例如(ru)，10%和15%的(de)結果都可(ke)以接受(shou)的(de)話，則應(ying)使用10%進(jin)行培養，一方(fang)面可(ke)以節省血清使用，其次也可(ke)以降低血清存(cun)在時對細胞生(sheng)長(chang)產生(sheng)的(de)其他(ta)不可(ke)控影響因素。

第二種：生長曲線

從生長曲線可以判斷不同批次間的血清對細胞生長的影響。以正常培(pei)養的(de)(de)濃度進行細胞(bao)接(jie)種，并觀察(cha)記錄(lu)細胞(bao)達(da)到(dao)不同的(de)(de)密度所需要用到(dao)的(de)(de)時間。

例如，如果細胞使用這一批次的血清時，其生長停滯期的時間較長，說明細胞需要對這個批次的血清進行較長時間的適應后才能正常生長；如果細(xi)胞(bao)進入(ru)指數增長期(qi)后(hou)，倍(bei)增速(su)度快，也就(jiu)是長得很快，說(shuo)明(ming)這批次的血(xue)清對(dui)細(xi)胞(bao)的生長促進效果很明(ming)顯；如果細胞進入平臺期后，其密(mi)度比(bi)以往(wang)的血(xue)清批(pi)次要更高，說明該批(pi)次的血(xue)清的經濟效率更高，反之亦然。

可以直接用(yong)MTT繪制細胞(bao)的(de)生長曲線，也(ye)可以用可連續觀察的(de)細胞(bao)計(ji)數儀或觀測系統。

第三種：細胞特征觀察

細(xi)胞特征觀察用(yong)于判(pan)斷該血(xue)清是否會存在一些影響因子，對細(xi)胞的(de)基因表達產生影響。

這個實驗對藥物(wu)篩選、需要細胞定向(xiang)分(fen)化或分(fen)泌物(wu)進行(xing)的項目非常有必要。

觀察細胞特征，除了要對(dui)細胞的形態特征進行判斷，還需要從分子和蛋白水平去檢測對(dui)比(bi)。

例如(ru)在正(zheng)常培養階段，提取細胞RNA進(jin)行待研究(jiu)的基(ji)因的表達分析(xi)，看(kan)看(kan)血(xue)清(qing)是否會對該基(ji)因的表達產(chan)生上調(diao)或抑制，如(ru)果有，那說明該血(xue)清(qing)的存在可(ke)能會影響(xiang)你的課題實(shi)驗(yan)的結果準(zhun)確(que)性。

第四種：血清污染物的檢測

通(tong)常商業化的(de)血(xue)清(qing)出廠前(qian)都會(hui)進行嚴格的(de)微生物清(qing)除，但仍有極少(shao)數可能有部分的(de)血(xue)清(qing)會(hui)存(cun)在支(zhi)原(yuan)體的(de)污(wu)染，或在實驗(yan)室進行血(xue)清(qing)分裝時(shi)帶入了(le)微生物的(de)污(wu)染。

因此(ci)，我建議，有條件的(de)同學在(zai)使用血清前，應該先取一點血清或已配制(zhi)完成(cheng)的(de)血清細胞培養(yang)(yang)基進行空白培養(yang)(yang)，觀察其是否(fou)存在細菌、真菌等(deng)微生物的(de)(de)污染，確(que)認沒有問題后再進行正式的(de)(de)細胞培養(yang)(yang)。

而支原體污染的(de)風險，則只能通過(guo)PCR、熒光染色等進(jin)一(yi)步的(de)實(shi)驗方法(fa)進(jin)行檢測了。

這(zhe)里還需要特(te)別強(qiang)調的一點(dian)是，有(you)的同學(xue)會通過看血(xue)清的顏色是否紅、橙紅來判斷血(xue)清質(zhi)量，這(zhe)是玄學(xue)，沒有(you)科學(xue)依據。

血清的顏色(se)如果(guo)較紅，代表(biao)其(qi)在采集過程(cheng)中(zhong)，動物出現了(le)一定程(cheng)度的溶血，這和采集工藝有(you)關(guan)，和血清本身(shen)質量無關(guan)。

另外，血清解凍后(hou)，有(you)時(shi)會看(kan)到有(you)一些絮狀物(wu)，這種絮狀物(wu)也不一定(ding)是(shi)微生物(wu)污染，有(you)可(ke)能是(shi)血清內的(de)(de)蛋(dan)白質凝(ning)集而成的(de)(de)。

它的存在可(ke)能對細胞(bao)產(chan)生(sheng)刺激(ji)，不利于細胞(bao)生(sheng)長，但(dan)血(xue)清(qing)還是可(ke)以(yi)用的，這些(xie)絮(xu)狀物體積大無法(fa)通(tong)過(guo)過(guo)濾去除(chu)(chu)，我們(men)可(ke)以(yi)嘗(chang)試離心完成清(qing)除(chu)(chu)后繼續使用該(gai)瓶血(xue)清(qing)。