免疫細胞(bao)化學是一種利用特(te)異性(xing)抗(kang)體體檢測抗(kang)原(yuan), 并且可以在(zai)顯微鏡下觀察細胞(bao)內(nei)抗(kang)原(yuan)定位的方法。在(zai)IC中經常會(hui)使用熒光進行檢測。
主要有兩種方(fang)法:直(zhi)接法、間接法。
直接(jie)法:是直接(jie)在第一抗體上(shang)(shang)附上(shang)(shang)熒(ying)光標(biao)記 進行檢(jian)測(直接(jie)法)。
間接法:是(shi)熒光標記的(de)第(di)二抗(kang)體與(yu)第(di)一抗(kang)體反(fan)應并進行檢測。
使用直接法(fa)時,通過(guo)熒光(guang)染色(se)可以更容易(yi)的(de)進行多重染色(se)。在這種(zhong)情況下,我們需要找到熒光(guang)間(jian)不會相互干擾的(de)組合(he)。
直接法的優點: 1.特別是使用(yong)熒光(guang)標記的第一抗(kang)體 時,易于進行多重(zhong)染色。
2.不會(hui)出(chu)現(xian)第二抗體引起的非特異性染色(se)。
3.可以(yi)縮短操作(zuo)時間。
間接法的優點:
如果使用的第一抗(kang)體來自相(xiang)同(tong)的宿(su)主(zhu),那么可以使用相(xiang)同(tong)的標記(ji)第二(er)抗(kang)體,且較為通用。
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