進行(xing)蛋(dan)白質印(yin)跡實(shi)驗時，必須優化(hua)一(yi)抗和二抗的(de)量以(yi)減(jian)少背景并確保(bao)獲得足夠(gou)的(de)信號。我們的(de)促旋酶多(duo)克(ke)隆抗體和單克(ke)隆抗體已經過測試(shi)，可以(yi)減(jian)少進一(yi)步優化(hua)的(de)需要。*

如果(guo)已加(jia)入純(chun)蛋(dan)白，則應將一(yi)抗(kang)(kang)(kang)稀釋 1:1,000；如果(guo)加(jia)入細(xi)胞(bao)裂解物，則應將一(yi)抗(kang)(kang)(kang)稀釋 1:200。稀釋液(ye)(ye)通常在洗(xi)滌(di)(di)(di)緩沖(chong)液(ye)(ye)（1X TBS、0.1% Tween 20、1% 脫脂奶粉）中(zhong)進行(xing)，每片(pian)印跡 20 ml，孵育 1 小(xiao)時。用洗(xi)滌(di)(di)(di)緩沖(chong)液(ye)(ye)洗(xi)滌(di)(di)(di)以去除(chu)一(yi)抗(kang)(kang)(kang)后，將二抗(kang)(kang)(kang)以 1:5,000 的稀釋度加(jia)入洗(xi)滌(di)(di)(di)緩沖(chong)液(ye)(ye)中(zhong)（多克(ke)(ke)隆(long)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)為抗(kang)(kang)(kang)兔抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)，單克(ke)(ke)隆(long)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)為抗(kang)(kang)(kang)鼠抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)）。

然(ran)后可以使用標準比色法或化學發(fa)光法對印跡進行可視化。

* 優化條件適用于 SDS-PAGE 微型凝膠，其中每條泳道中裝有(you) 1 µg 蛋(dan)(dan)白質樣品（純化蛋(dan)(dan)白質或細胞提取物），凝膠在印(yin)跡(ji)前在標(biao)準 SDS-PAGE 條件下運行（43 kDa 蛋(dan)(dan)白質 200 mA 運行 45 分(fen)鐘(zhong)或 90 kDa 或 97 kDa 蛋(dan)(dan)白質 200 mA 運行 60 分(fen)鐘(zhong)）。

北京和一生(sheng)物科技(ji)有限(xian)公司專業代理inspiralis全系列產品(pin)，專營(ying)進口生物(wu)試劑，科學儀器，實驗消耗品(pin)，化工原(yuan)料(liao)及(ji)藥物(wu)中間體等。公司(si)與諸多國外(wai)品(pin)牌簽下(xia)代理，sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等，能為廣(guang)大科研用戶(hu)提供數萬種(zhong)試劑、儀(yi)器和(he)實驗消耗品。

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